前 言
本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：吉林省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心。
本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：王楠、邵洪澤、于欽磊、王曉鋒、阮書祥、柴方紅、高春生、劉芳、王欣睿、石春軍、江希玲、蔣云巖、于冰。
1 警告
使用本標(biāo)準(zhǔn)中理化檢驗(yàn)方法的人員應(yīng)有正規(guī)實(shí)驗(yàn)室工作的實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)。本標(biāo)準(zhǔn)并未指出所有可能的生物安全問(wèn)題。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有程序和適當(dāng)?shù)拇胧┍苊獗粰z樣品在存儲(chǔ)、檢查和檢驗(yàn)過(guò)程中發(fā)生腐敗變質(zhì)、丟失或損壞，同時(shí)保證樣品的生物安全，保障相關(guān)人員、環(huán)境的安全，并保證符合國(guó)家有關(guān)法規(guī)規(guī)定的條件。
2 范圍
本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了未經(jīng)檢疫的沒(méi)有浸泡、熟制及化學(xué)藥品處理的豬、牛、羊及家禽等病死動(dòng)物胴體、分割肉品的感官檢查、理化檢驗(yàn)方法。
本標(biāo)準(zhǔn)適用于病死畜禽肉的鑒別。
3 規(guī)范性引用文件
下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。
GB 27401 實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范 動(dòng)物檢疫
GB 16548 病害動(dòng)物和病害動(dòng)物產(chǎn)品生物安全處理規(guī)程
4 術(shù)語(yǔ)和定義
下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)。
4.1 病死畜禽肉
指因病死亡的畜禽胴體及分割的肉品。
5 樣品采集、運(yùn)輸及保存
采畜禽胴體腿部、背部、胸部等肌肉各150 g，或已分割肉品300 g，裝入編號(hào)的采樣瓶中，冷藏運(yùn)輸。樣品到達(dá)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)在24 h內(nèi)進(jìn)行理化檢驗(yàn)，如不能及時(shí)檢驗(yàn)應(yīng)于 -20℃保存。
6 感官檢查
6.1 方法
6.1.1 視檢
肉眼觀察畜禽肉的皮膚、肌肉、脂肪的色澤、組織性狀及深層組織的變化。
6.1.2 嗅檢
通過(guò)嗅覺(jué)器官檢查畜禽肉有無(wú)異常氣味。
6.1.3 觸檢
以手觸摸檢查組織的彈性、粘性、軟硬度及腫物。
6.1.4 剖檢
解剖若干部位的皮膚、肌肉、脂肪、淋巴結(jié)等，以檢查其形狀、色澤是否正常。
6.2 內(nèi)容
6.2.1 放血狀況
畜禽肉呈暗紅色或黑紅色，脂肪染成淡紅色，肌肉斷面上可見(jiàn)一處或多處暗紅色血液浸潤(rùn)區(qū)；血管內(nèi)有較多血液，呈紫紅色；血液中有時(shí)可見(jiàn)氣泡；宰殺刀口切面平整不外翻，刀口周圍組織稍有或全無(wú)血液浸潤(rùn)現(xiàn)象；有血液墜積性淤血。
6.2.2 皮膚
畜禽皮膚有出血點(diǎn)、淤血點(diǎn)（出血斑）、壞死、結(jié)痂和黃染等變化；禽皮膚呈紫紅色、暗黑色、鐵青色，冠、髯呈紫紅色、青紫色、紫黑色，拔毛不凈，毛孔突出，一側(cè)性血液沉積；典型的可見(jiàn)到全身皮膚呈紫紅色或青紫色。
6.2.3 肌肉
畜禽肌肉無(wú)彈性，灰暗無(wú)光，或暗紅色、黑紅色，松軟發(fā)粘；剝皮肉的表面常見(jiàn)血珠滲出；切面呈暗紅色或紫色，常有暗紅色或黑紅色血珠滲出。
6.2.4 脂肪
畜禽脂肪呈淡紅色、黃紅色或綠色。
6.2.5 淋巴結(jié)
畜禽淋巴結(jié)腫脹、充血、出血；切面呈紫紅色、暗紅色或黑紅色。
7 理化檢驗(yàn)
7.1 濾紙條血液浸潤(rùn)法 見(jiàn)附錄A 中 A.2.1。
7.2 愈創(chuàng)木脂酊反應(yīng)法 見(jiàn)附錄A 中 A.2.2。
7.3 硫酸銅肉浸液（肉湯）反應(yīng)法 見(jiàn)附錄A 中 A.2.3。
7.4 微生物內(nèi)毒素呈色反應(yīng)法 見(jiàn)附錄A 中 A.2.4。
8 結(jié)果判定
8.1 感官檢查中，符合6.2.1、6.2.2 其中一項(xiàng)的判定為病死畜禽肉。
8.2 感官檢查中，符合6.2.3、6.2.4、6.2.5 其中一項(xiàng)的判定為疑似病死畜禽肉。 疑似病死畜禽肉應(yīng)進(jìn)行理化檢驗(yàn)。
8.3 疑似病死畜禽肉理化檢驗(yàn)，符合下列結(jié)果之一的，判定為病死畜禽肉。
a) 7.1 或 7.2 檢驗(yàn)結(jié)果為陽(yáng)性（＋）的。
b) 7.3 檢驗(yàn)結(jié)果為陽(yáng)性（＋）的。
c) 7.4 檢驗(yàn)結(jié)果為陽(yáng)性（＋）的。
9 被檢樣品及廢棄物的處理
被檢樣品自發(fā)出檢驗(yàn)報(bào)告后，需保存6個(gè)月方可進(jìn)行無(wú)害化處理。檢測(cè)廢棄物及到期的樣品需經(jīng)高溫高壓等無(wú)害化處理。
附 錄 A
?。ㄒ?guī)范性附錄）
病死畜禽肉理化檢驗(yàn)方法
A.1 材料
A.1.1 器材
檢驗(yàn)刀、剪刀、鑷子、微型天平、微型絞肉機(jī)、試管架、試管、小滴管、帶塞試管、100 mL三角燒瓶、100mL燒杯、培養(yǎng)皿、酒精燈、樣品瓶、樣品稀釋瓶、微量加樣器、濾紙條、記號(hào)筆。
A.1.2 試劑
5%愈創(chuàng)木脂酊，3%過(guò)氧化氫溶液，5%硫酸銅溶液， 5%草酸溶液，4%氫氧化鈉溶液1%甲酚藍(lán)乙醇溶液，0.5%硝酸銀溶液，40%鹽酸溶液，1%高錳酸鉀溶液。
A.2 方法
A.2.1 濾紙條血液浸潤(rùn)法
A.2.1.1 操作方法
將試驗(yàn)用干濾紙條裁成長(zhǎng)5cm、寬0.5cm 的濾紙條，取濾紙條一張將其一端插入被檢肉品的新切口內(nèi)1cm—2cm 深，經(jīng)2min—3min 觀察浸潤(rùn)情況。
A.2.1.2 結(jié)果判定
濾紙條被血樣液浸潤(rùn)且超出插入部分2mm以上為陽(yáng)性（＋）；無(wú)血樣浸潤(rùn)為陰性(－)。
A.2.2 愈創(chuàng)木脂酊反應(yīng)法
A.2.2.1 操作方法
從采樣肉品切取片狀肌肉（3cm×2cm×0. 5cm）一塊，新鮮切面朝上平置于培養(yǎng)皿中，在肉片上滴加5%愈創(chuàng)木脂酊5ml、3%過(guò)氧化氫溶液 5～10滴。
A.2.2.2 結(jié)果判定
被檢肉片變?yōu)樯钏{(lán)色，肉片周圍溶液呈深藍(lán)色為陽(yáng)性（＋）；被檢肉片不變顏色，肉片周圍溶液呈淡藍(lán)色環(huán)或無(wú)變化為陰性（－）。
A.2.3 硫酸銅浸液（肉湯）反應(yīng)法
A.2.3.1 操作方法
A.2.3.1.1 稱取樣品肌肉10g，剪碎，置于100ml三角燒瓶中，加入蒸餾水30ml，攪均后加塞，置水浴中煮沸10min，趁熱過(guò)濾，即為10:30肉湯，冷卻至室溫，待檢。
A.2.3.1.2 已知健康動(dòng)物肉品肉湯制作方法同被檢樣品肉湯。
A.2.3.1.3 取試管3支，分別設(shè)定為試驗(yàn)管、對(duì)照管Ⅰ、對(duì)照管Ⅱ：
A.2.3.1.4 試驗(yàn)管加入被檢肉品肉湯2ml，對(duì)照管Ⅰ加入已知健康動(dòng)物肉品肉湯2 ml，對(duì)照管Ⅱ加入蒸餾水2ml。
A.2.3.1.5 分別向3支試管加入5%硫酸銅溶液5滴，混均，靜置，觀察反應(yīng)。
A.2.3.2 結(jié)果判定
A.2.3.2.1 試管內(nèi)肉湯出現(xiàn)明顯渾濁為陽(yáng)性（＋）。
A.2.3.2.2 試管內(nèi)肉湯澄清透明為陰性（－）。
A.2.3.2.3 加入蒸餾水的試管內(nèi)液體顏色不發(fā)生變化。
A.2.4 微生物內(nèi)毒素呈色反應(yīng)法
A.2.4.1 操作方法
A.2.4.1.1 無(wú)菌稱取樣品肌肉10g，剪碎；加入滅菌生理鹽水20ml，4 %氫氧化鈉溶液10滴，研磨成粥狀；置于100 ml三角燒瓶中，加熱至沸，冷卻，滴加5%草酸溶液5滴，過(guò)濾，即為10:20提取液，待檢。
A.2.4.1.2 已知健康動(dòng)物肉品提取液制作方法同被檢樣品提取液。
A.2.4.1.3 取滅菌試管3支，分別設(shè)定為試驗(yàn)管、對(duì)照管Ⅰ、對(duì)照管Ⅱ：
A.2.4.1.4 試驗(yàn)管加入待檢樣品提取液2ml、對(duì)照管Ⅰ加入健康動(dòng)物肉品提取液2 ml、對(duì)照管Ⅱ加入滅菌生理鹽水2ml；
A.2.4.1.5 分別向3支試管滴加1%甲酚藍(lán)乙醇溶液1滴；
A.2.4.1.6 分別向3支試管滴加0.5%硝酸銀溶液3滴；
A.2.4.1.7 分別向3支試管滴加40%鹽酸溶液1滴；
A.2.4.1.8 將3支試管振搖混均后，分別滴加1%高錳酸鉀溶液2～3滴，振搖混均，觀察結(jié)果。
A.2.4.2 結(jié)果判定
A.2.4.2.1 試管內(nèi)肉品提取液顯示藍(lán)紫色或藍(lán)綠色為陽(yáng)性（＋）。
A.2.4.2.2 試管內(nèi)提取液豬肉顯紅紫色或紅褐色，牛、羊肉顯淺褐色，禽肉顯灰白色為陰性（－）。
A.2.4.2.3 加入蒸餾水的試管內(nèi)液體顏色不發(fā)生變化。
本標(biāo)準(zhǔn)由吉林省衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì)于2013年12月31日發(fā)布，2013年12月31日實(shí)施。
